1. 微生物檢測的核心目標是檢測樣品中是否存在特定的________或其________。
2. 無菌操作的核心原則是防止________微生物污染樣品或環境。
3. 微生物實驗室根據生物安全等級分為________級(BSL-1到BSL-4)。
4. 高壓蒸汽滅菌的常用條件是________℃下維持________分鐘。
5. 干熱滅菌法主要用于________和________的滅菌。
6. 采集具有代表性的樣品時,需遵循________和________原則。
7. 冷凍樣品應在________℃以下保存和運輸,以抑制微生物生長。
8. 水樣微生物檢測(如總大腸菌群)通常采集________ml。
9. 對固體樣品進行均質化處理時,常使用________或________。
10. 制備樣品稀釋液時,最常用的稀釋液是________或________。
11. 培養基按照物理狀態可分為________培養基、________培養基和________培養基。
12. 用于分離培養的固體培養基中,常加入________作為凝固劑。
13. ________培養基(如營養瓊脂)允許大多數微生物生長。
14. ________培養基(如SS瓊脂)抑制某些微生物生長,促進目標微生物生長。
15. ________培養基(如EMB瓊脂)能通過顏色變化或產生特定產物來區分不同微生物。
16. 倒平板時,培養基溫度應冷卻至約________℃左右,以免燙死微生物或產生過多冷凝水。
17. 傾注平板法主要用于________樣品的活菌計數。
18. 涂布平板法適用于________樣品或________樣品的活菌計數。
19. 劃線分離法的主要目的是獲得________菌落。
20. 在EMB培養基上,典型的大腸桿菌菌落常呈現________色,帶有________光澤。
21. 革蘭氏染色是區分細菌________性的經典方法。
22. 革蘭氏染色步驟依次是:結晶紫初染→________媒染→________脫色→________復染。
23. 革蘭氏陽性菌最終呈現________色,革蘭氏陰性菌最終呈現________色。
24. 抗酸染色(如Ziehl-Neelsen法)主要用于檢測________屬細菌。
25. 芽孢染色中,常用的復染劑是________。
26. 莢膜染色通常采用________染色法,背景著色而莢膜不著色。
27. 細菌的________試驗用于檢測細菌是否產生細胞色素C氧化酶。
28. IMViC試驗是用于鑒定________菌群的重要生化試驗組合,包括________、________、________和________試驗。
29. 吲哚試驗中,加入________試劑后呈現紅色環為陽性,表明細菌能分解色氨酸產生吲哚。
30. 甲基紅試驗中,培養基pH≤________時加入甲基紅指示劑呈紅色,為陽性。
31. V-P試驗中,加入________和________試劑,出現紅色為陽性。
32. 檸檬酸鹽利用試驗中,能利用檸檬酸鹽的細菌會使培養基中的________指示劑由綠色變為________色。
33. 糖發酵試驗中,產酸通常使培養基中的________指示劑變黃,產氣則可在倒置的________中觀察到氣泡。
34. 硫化氫試驗陽性,可在含有________或________的培養基中觀察到黑色沉淀。
35. 尿素酶試驗陽性,培養基(含________指示劑)由黃色變為________色。
36. 凝固酶試驗是鑒別________的重要試驗,陽性表明該菌可能具有致病性。
37. 用于厭氧菌培養的常用設備是________罐或________培養箱。
38. 細菌在液體培養基中生長可表現為________、________、________或形成菌膜等。
39. 觀察真菌菌落形態時,常注意其________、________、________和________等特征。
40. PCR技術的基本原理是________擴增。
41. PCR反應體系包含模板DNA、________、________、________和緩沖液。
42. 設計PCR引物的基本原則之一是引物的________值相近,通常為________℃左右。
43. 實時熒光定量PCR (qPCR) 可以同時實現________和________。
44. 凝膠電泳中,________染色常用于觀察DNA條帶。
45. ELISA的中文全稱是________。
46. 在直接ELISA中,酶標記在________上。
47. 膠體金免疫層析技術常用于________檢測,結果通常在________分鐘內判讀。
48. 微生物限度檢查是檢測非無菌藥品中________微生物和________微生物的總量。
49. 無菌檢查法用于證明藥品或醫療器械是否________。
50. 在微生物檢測結果報告中,若未檢出目標菌,應報告為________或________(根據方法要求)。
答案與解析
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微生物; 代謝產物/毒素 (解析:檢測對象包括微生物本身或其產生的有害物質。)
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外源/外來 (解析:無菌操作的核心是防止環境或其他來源的微生物污染實驗材料。)
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四 (解析:生物安全實驗室分為4個等級,處理不同危險程度的微生物。)
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121; 15-20 (解析:這是最常用、最有效的濕熱滅菌條件。)
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玻璃器皿; 金屬器械/油性物質/粉末 (解析:干熱適用于不宜用高壓蒸汽滅菌且耐高溫的物品。)
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隨機; 適量 (解析:確保樣品能代表整體,并滿足檢測需要。)
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-18/-20 (解析:冷凍溫度能有效抑制絕大多數微生物繁殖。)
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100/250/500 (解析:常見取樣量,具體標準可能不同。100ml是很多水質標準中的常用量。)
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均質器/勻漿器; 無菌研缽和研棒 (解析:使樣品均勻分散,便于微生物釋放和計數。)
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無菌生理鹽水; 磷酸鹽緩沖液(PBS)/蛋白胨鹽水 (解析:維持滲透壓,減少對微生物的損傷。生理鹽水最常用。)
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液體; 固體; 半固體 (解析:根據實驗目的選擇不同狀態的培養基。)
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瓊脂 (解析:瓊脂是理想的培養基凝固劑,常溫凝固,不被大多數微生物分解。)
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基礎/營養 (解析:提供基本營養,無選擇性。)
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選擇性 (解析:添加抑制劑抑制非目標菌,利于目標菌生長。)
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鑒別/指示 (解析:通過指示劑或特定反應區分不同微生物的代謝特性。)
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45-50 (解析:溫度過高會殺死微生物或使瓊脂無法凝固,過低則易凝固無法倒板。)
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液體/可溶性 (解析:樣品可直接或稀釋后與熔化的瓊脂混合。)
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含菌量低; 對熱敏感 (解析:樣品涂布在已凝固的培養基表面,避免熱瓊脂的損傷。)
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單個/純 (解析:通過劃線稀釋,最終得到由單個細胞繁殖形成的菌落。)
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紫黑/深紫; 金屬/綠色 (解析:大腸桿菌發酵乳糖產酸,使伊紅美藍結合,呈現特征性金屬光澤。)
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陰陽 (解析:基于細胞壁結構差異的染色分類法。)
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碘液; 酒精/乙醇/丙酮; 番紅/沙黃/稀釋復紅 (解析:標準革蘭染色四步法及常用試劑。)
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紫; 紅/粉紅 (解析:革蘭陽性菌保留結晶紫-碘復合物呈紫色;革蘭陰性菌被脫色后吸收復染劑呈紅色。)
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分枝桿菌(Mycobacterium) (解析:如結核分枝桿菌、麻風分枝桿菌具有抗酸特性。)
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番紅/沙黃 (解析:復染使菌體呈現紅色,與綠色的芽孢形成對比。)
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負 (解析:染色背景和菌體,而透明的莢膜不著色,在深色背景下呈現透明暈圈。)
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氧化酶 (解析:檢測細胞色素C氧化酶的存在,是區分細菌的一個重要指標,如奈瑟菌屬、假單胞菌屬通常陽性。)
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腸桿菌; 吲哚(Indole); 甲基紅(Methyl Red); V-P (Voges-Proskauer); 檸檬酸鹽(Citrate) (解析:IMViC是這四項試驗的首字母縮寫,用于區分大腸桿菌和產氣腸桿菌等腸道菌。)
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柯凡克(Kovac's) (解析:柯凡克試劑(對二甲氨基苯甲醛)與吲哚反應生成紅色化合物。)
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4.4 (解析:甲基紅在pH 4.4以下顯紅色,4.4以上顯黃色,陽性表明產強酸能力強。)
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α-萘酚; 氫氧化鉀/KOH (解析:V-P試劑由α-萘酚乙醇溶液和40% KOH組成,與乙酰甲基甲醇反應呈紅色。)
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溴麝香草酚藍; 深藍/普魯士藍 (解析:細菌利用檸檬酸鹽生成堿性產物,使指示劑由綠變藍。)
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溴甲酚紫/溴麝香草酚藍/酚紅; 杜漢小管/Durham tube (解析:指示劑在酸性條件下變色;杜漢小管倒置于試管中收集氣體。)
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硫酸亞鐵; 硫代硫酸鈉/醋酸鉛 (解析:細菌產生H₂S,與鐵離子或鉛離子結合生成黑色FeS或PbS沉淀。)
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酚紅; 粉紅/紫紅 (解析:尿素酶分解尿素產氨,使培養基變堿,酚紅由黃變紅。)
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金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) (解析:凝固酶能使血漿凝固,是金黃色葡萄球菌的重要毒力因子和鑒定指標。)
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厭氧; 厭氧 (解析:提供無氧環境以培養專性或兼性厭氧菌。)
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均勻渾濁; 沉淀; 菌膜/菌環 (解析:不同生長特性反映細菌對氧的需求、運動性等。)
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大小; 形狀; 顏色; 質地(絨毛狀/粉末狀等) (解析:真菌菌落形態是重要的初步鑒定依據。)
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體外DNA/核酸 (解析:聚合酶鏈式反應是在體外通過溫度循環特異性擴增DNA片段的技術。)
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引物; dNTPs (脫氧核糖核苷三磷酸); DNA聚合酶(Taq酶) (解析:PCR反應必需的五大組分。)
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Tm (解鏈溫度); 55-65 (解析:引物Tm值相近且合適,是保證擴增特異性和效率的關鍵。常用引物Tm在55-65℃之間。)
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擴增; 定量 (解析:qPCR通過熒光信號實時監測擴增過程,實現精確定量起始模板量。)
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溴化乙錠(EB)/GelRed/SYBR Green (解析:這些染料能嵌入DNA雙鏈,在紫外光下發出熒光。EB有毒性,后兩者更安全。)
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酶聯免疫吸附測定 (解析:Enzyme-Linked Immunosorbent Assay的縮寫。)
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一抗/檢測抗體 (解析:在直接ELISA中,酶直接標記在識別抗原的特異性抗體(一抗)上。)
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快速/現場; 10-15 (解析:膠體金層析技術操作簡便快速,結果肉眼判讀,常用于即時檢測(POCT)。)
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需氧菌; 霉菌和酵母菌 (解析:微生物限度檢查規定需氧菌總數和霉菌酵母菌總數兩項。)
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無菌 (解析:該檢查旨在證明產品中無存活微生物存在。)
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未檢出; < [方法檢出限] (解析:報告結果需明確是未檢出,或注明低于方法的檢測限值。)