一、儲存與解凍規范
1.長期儲存條件
未拆封血清應存放于-20℃(短期可-80℃),避免反復凍融。
分裝時預留10%體積空間(凍融后體積膨脹)。
2.解凍方法
程序性解凍:從-20℃移至4℃冰箱過夜,再室溫搖勻至溶解。
禁忌:禁止直接37℃水浴或高溫解凍(易致蛋白變性沉淀)。
二、沉淀問題與處理
1.沉淀成分
主要為纖維蛋白、脂蛋白、磷酸鈣等,屬正常現象。
巨噬細胞培養時需注意沉淀可能影響結果。
2.處理方法
離心法:400-1000×g離心5-10分鐘,取上清使用。
避免過濾:可能堵塞濾膜或損失營養成分。
三、其他關鍵注意事項
1.熱滅活
非必要步驟,56℃/30分鐘滅活會顯著增加沉淀。
2.短期保存
4℃存放不超過1個月,長期需分裝冷凍。
3.污染判斷
磷酸鈣沉淀易誤認為微生物污染(顯微鏡下可見布朗運動)。
注:具體操作需結合產品說明書,不同品牌血清可能存在差異。
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