亦稱氨酰tRNA連接酶，氨基酸活化酶，是合成氨酰tRNA的酶。20種氨基酸，均有其相應的專一性的氨酰tRNA合成酶（ARS）中。一般認為它參與下列所示的兩步反應，在ATP存在下使氨基酸活化，并與tRNA的CCA末端結合。

　　此酶能專一性地辨認氨基酸的側鏈和tRNA。因為由于具有這樣高專一性底物的酶，所以mRNA的遺傳信息能準確無誤地反映在蛋白質的氨基酸序列上。